КУЛЬТУРЫ ОСТРОВКОВЫХ КЛЕТОК КАК КОМПОНЕНТ ТКАНЕИНЖЕНЕРНОЙ КОНСТРУКЦИИ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Цель работы – разработка методов получения культур островковых клеток (ОК) с целью дальнейшего их использования в качестве клеточного компонента тканеинженерной конструкции поджелудочной железы (ПЖ). В качестве источника культур ОК была выбрана ПЖ новорожденных кроликов как доступная и хорошо изученная донорская модель.

Материалы и методы. Культуры ОК выделяли из ПЖ 1–3-дневных новорожденных кроликов. Изменения, происходящие в процессе культивирования панкреатической ткани, фиксировали с помощью инвертированного микроскопа и биостанции. Морфологический анализ образцов культур проводили с использованием гистологических и специфических иммуногистохимических методов. Инсулинпродуцирующую активность культур определяли с помощью иммуноферментного анализа.

Результаты. Получены три основных типа культур: флотирующие островковоподобные, имеющие органотипический характер, суспензионные, имеющие цитотипический характер, и однослойные, состоящие из прогениторных клеток протокового происхождения. Бóльшая морфологическая сохранность и адекватная инсулинпродуцирующая способность была выявлена у флотирующих островковоподобных культур.

Заключение. По своим морфофункциональным свойствам флотирующие островковоподобные культуры, полученные из ПЖ новорожденных кроликов, могут быть использованы в качестве основного клеточного компонента экспериментальной модели ТИК ПЖ. 

1. Севастьянов ВИ, Перова НВ. Инъекционный гетерогенный биополимерный гидрогель для заместительной и регенеративной хирургии и способ его получения. Патент РФ № 2433828 (2010).

2. Биосовместимые материалы: учебное пособие / Под ред. В.И. Севастьянова и М.П. Кирпичникова. М.: МИА, 2011.

3. Amer LD, Mahoney MJ, Bryant SJ. Tissue Engineering Approaches to Cell-Based Type 1 Diabetes. Therapy Tissue Engineering Part B: Reviews. October 2014; 20 (5): 455–467. doi:10.1089/ten.teb.2013.0462.

4. Kroon E, Martinson LA, Kadoya K. Pancreatic endoderm derived from human embryonic stem cells generates glucose-responsive insulin-secreting cells in vivo. Nat. Biotechnol. 2008; 26: 443–451.

5. Gabr MM, Sobh MM, Zakaria MM, Refaie AF, Ghoneim MA. Transplantation of insulin-producing clusters derived from adult bone marrow stem cells to treat diabetes in rats. Exp. Clin. Transplant. 2008; 6: 236–241.

6. Chiou SH, Chen SJ, Chang YL. A promotes the reprogramming of placenta-derived multipotent stem cells into pancreatic islets-like and insulin-positive cells. J. Cell Mol. Med. 2010 Feb: 16–22.

7. Кирсанова ЛА, Баранова НВ, Скалецкий НН, Зайденов ВА, Бубенцова ГН, Пушкова ИА. Поджелудочная железа новорожденных кроликов как источник прогениторных клеток. Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2011; 13 (1): 61–64.

8. Martens GA, Cai Y, Hinke S, Stange G, van de Casteele M, Pipeleers D. Glucose suppresses superoxide generation in metabolically responsive pancreatic β-cells. The Journal of Biological Chemistry. 2005; 280 (21): 20389–20396.