Разработка методики получения дермального внеклеточного матрикса
https://doi.org/10.15825/1995-1191-2019-4-81-87
Аннотация
Несмотря на достижения современной хирургии в лечении повреждений кожных покровов, актуальным остается поиск новых методов для более быстрого и эффективного заживления ран. Тканевая инженерия, несомненно, представляет интерес для разработки таких технологий. Цель данной работы состояла в определении оптимального протокола получения децеллюляризированного дермального матрикса для последующей разработки тканеинженерной кожи. Материалы и методы. Экспериментальным животным был 1 поросенок породы Ландрас. После предварительной обработки кожи дерматомом забирали образцы толщиной 0,3 см. В работе рассматривалось 2 протокола децеллюляризации: протокол № 1 на основе применения тритон Х100 и дезоксихолата, протокол № 2 только на основе дезоксихолата. Всего циклов обработки по 2 протоколам было 5. Ацеллюлярные матриксы после обработки были исследованы следующим образом: гистологический анализ, количественное определение содержания ДНК. Далее была проведена статическая рецеллюляризация матриксов фибробластами дермы свиньи. После чего матриксы были исследованы на цитотоксичность с помощью ХТТ-теста и теста на дифференциальное окрашивание живых и погибших клеток. Результаты. Проведенный сравнительный анализ двух протоколов децеллюляризации дермы свиной кожи показал, что оба протокола эффективно удаляют клетки и ядерный материал, при этом сохраняется архитектоника межклеточного вещества неповрежденной, так как не происходит разрушения волокнистых структур. Но при оценке биосовместимости матриксов на основе анализа жизнеспособности клеток по данным ХТТ-теста и адгезии клеток к матриксу преимущества демонстрирует матрикс, обработанный по протоколу № 1. Заключение. В настоящем исследовании был отмечен протокол децеллюляризации на основе тритон Х100 и дезоксихолата. Полученные результаты являются первым этапом для дальнейшей разработки тканеинженерной кожи.
При поддержке: Работа выполнена при поддержке комплексной НИР «Клеточные механизмы регенерации интраторакальных органов и тканей. Разработка тканеинженерных конструкций с использованием биологических и синтетических каркасов».
Об авторах
A. С. Сотниченко
ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава России
Россия
Россия
Сотниченко Александр Сергеевич
350063, Краснодар, ул. Седина, д. 4.
Тел. (962) 85-18-237.
И. В. Гилевич
ГБУЗ «Научно-исследовательский институт – Краевая клиническая больница № 1 имени С.В. Очаповского» Министерства здравоохранения Краснодарского края
Россия
Краснодар
Россия
Краснодар
К. И. Мелконян
ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава России
Россия
Краснодар
Россия
Краснодар
Я. А. Юцкевич
ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава России
Россия
Краснодар
Россия
Краснодар
А. В. Каракулев
ГБУЗ «Научно-исследовательский институт – Краевая клиническая больница № 1 имени С.В. Очаповского» Министерства здравоохранения Краснодарского края
Россия
Краснодар
Россия
Краснодар
С. Б. Богданов
ГБУЗ «Научно-исследовательский институт – Краевая клиническая больница № 1 имени С.В. Очаповского» Министерства здравоохранения Краснодарского края
Россия
Краснодар
Россия
Краснодар
И. М. Быков
ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава России
Россия
Краснодар
Россия
Краснодар
А. Н. Редько
ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава России
Россия
Краснодар
Россия
Краснодар
В. А. Порханов
ГБУЗ «Научно-исследовательский институт – Краевая клиническая больница № 1 имени С.В. Очаповского» Министерства здравоохранения Краснодарского края
Россия
Краснодар
Россия
Краснодар
С. Н. Алексеенко
ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава России
Россия
Краснодар
Россия
Краснодар
Список литературы
1. Groeber F, Holeiter M, Hampel M, Hinderer S, S Layland K. Skin tissue engineering – in vivo and in vitro applications. Advanced drug delivery reviews. 2011; 63 (4–5): 352–366.
2. Clark RA, Ghosh K, Tonnesen MG. Tissue engineering for cutaneous wounds. Journal of Investigative Dermatology. 2007; 127 (5): 1018–1029. doi: 10.1038/sj.jid.5700715.
3. Petrof G, Abdul-Wahab A, McGrath JA. Cell therapy in dermatology. Cold Spring Harbor perspectives in medicine. 2014; 4 (6): a015156.
4. You HJ, Han SK. Cell therapy for wound healing. Journal of Korean medical science, 2014; 29 (3): 311–319.
5. Wu SC, Marston W, Armstrong DG. Wound care: the role of advanced wound healing technologies. Journal of vascular surgery 2010; 52 (3): 59S–66S.
6. Sha H, Fu X. Naturally derived materials-based cell and drug delivery systems in skin regeneration. Journal of Controlled Release 2010; 142 (2): 149–159.
7. Reing JE, Brown BN, Daly KA, Freund JM, Gilbert TW, Hsiong SX et al. The effects of processing methods upon mechanical and biologic properties of porcine dermal extracellular matrix scaffolds. Biomaterials. 2010; 31 (33): 8626–8633.
8. Chen RN, Ho HO, Tsai YT, Sheu MT. Process development of an acellular dermal matrix (ADM) for biomedical applications. Biomaterials. 2004; 25 (13): 26792686.
9. Crapo PM, Gilbert TW, Badylak SF. An overview of tissue and whole organ decellularization processes. Biomaterials. 2011; 32 (12): 3233–3243.
Рецензия
Для цитирования:
Сотниченко A.С., Гилевич И.В., Мелконян К.И., Юцкевич Я.А., Каракулев А.В., Богданов С.Б., Быков И.М., Редько А.Н., Порханов В.А., Алексеенко С.Н. Разработка методики получения дермального внеклеточного матрикса. Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2019;21(4):81-87. https://doi.org/10.15825/1995-1191-2019-4-81-87
For citation:
Sotnichenko A.S., Gilevich I.V., Melkonian K.I., Yutskevich Y.A., Karakulev A.V., Bogdanov S.B., Bykov I.M., Redko A.N., Porhanov V.A., Alekseenko S.N. Techniques for obtaining dermal extracellular matrix scaffold. Russian Journal of Transplantology and Artificial Organs. 2019;21(4):81-87. https://doi.org/10.15825/1995-1191-2019-4-81-87
Просмотров:
1116
Послать статью по эл. почте 