vtioВестник трансплантологии и искусственных органовRussian Journal of Transplantology and Artificial Organs1995-1191Academician V.I.Shumakov National Medical Research Center of Transplantology and Artificial Organs", Ministry of Health of the Russian Federation10.15825/1995-1191-2026-1-206-211vtio-2013Research ArticleРегенеративная медицина и клеточные технологииRegenerative Medicine and Cell TechnologiesТехнология удаления клеточного материала из роговичных лентикул для последующей кератопластикиTechnique for decellularization of corneal lenticules for subsequent keratoplastyhttps://orcid.org/0009-0001-7800-3688ДолбилкинА. А.DolbilkinA. A.

Долбилкин Александр Александрович

664033, Иркутск, ул. Лермонтова, д. 337. Тел. (3952) 56-41-82

Aleksandr Dolbilkin

337, Lermontova str., Irkutsk, 664033

Phone: (3952) 56-41-82

fair.nous@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-4264-4408ЩукоА. Г.ShchukoA. G.

Иркутск

Irkutsk

nauka@mntk.irkutsk.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0547-7521ЮрьеваТ. Н.IurevaT. N.

Иркутск

Irkutsk

tnyurieva@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8071-2398ПисаревскаяО. В.PisarevskayaO. V.

Иркутск

Irkutsk

lesya_pisarevsk@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3857-6844КурсаковаЮ. В.KursakovaYu. V.

Иркутск

Irkutsk

julia.kursakova1970@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3980-050XШурыгинаИ. А.ShuryginaI. A.

Иркутск

Irkutsk

shurygina@rambler.ruИркутский филиал ФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр «Межотраслевой научно-технический комплекс «Микрохирургия глаза» имени академика С.Н. Федорова» Минздрава России; ФГБОУ ВО «Иркутский государственный медицинский университет» Минздрава РоссииРоссияIrkutsk Branch of Fyodorov Eye Microsurgery Federal State Institution; Irkutsk State Medical UniversityRussian FederationИркутский филиал ФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр «Межотраслевой научно-технический комплекс «Микрохирургия глаза» имени академика С.Н. Федорова» Минздрава России; ФГБОУ ВО «Иркутский государственный медицинский университет» Минздрава России; Иркутская государственная медицинская академия последипломного образования, филиал ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава РоссииРоссияIrkutsk Branch of Fyodorov Eye Microsurgery Federal State Institution; Irkutsk State Medical University; Irkutsk State Medical Academy of Postgraduate EducationRussian FederationИркутский филиал ФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр «Межотраслевой научно-технический комплекс «Микрохирургия глаза» имени академика С.Н. Федорова» Минздрава РоссииРоссияIrkutsk Branch of Fyodorov Eye Microsurgery Federal State InstitutionRussian FederationФГБНУ «Иркутский научный центр хирургии и травматологии» МинобрнаукиРоссияIrkutsk Scientific Center of Surgery and TraumatologyRussian Federation202631032026281206211Copyright © Долбилкин А.А., Щуко А.Г., Юрьева Т.Н., Писаревская О.В., Курсакова Ю.В., Шурыгина И.А., 20262026Долбилкин А.А., Щуко А.Г., Юрьева Т.Н., Писаревская О.В., Курсакова Ю.В., Шурыгина И.А.Dolbilkin A.A., Shchuko A.G., Iureva T.N., Pisarevskaya O.V., Kursakova Y.V., Shurygina I.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.transpl.ru/vtio/article/view/2013

В статье рассматриваются методы снижения частоты отторжения пересаженных тканей роговицы и поиск альтернатив полнослойным трансплантатам роговицы. Цель исследования заключается в разработке технологии удаления клеточного материала из роговичных лентикул человека, полученных в ходе рефракционных операций, для использования в качестве биоматериала при кератопластике. Предложена процедура децеллюляризации, в ходе которой лентикулы погружаются в 1% водный раствор лаурилсульфата натрия (SLS) на сутки, после чего очищаются от детергента с использованием забуференного раствора 0,9% NaCl в течение 5 дней. Эффективность децеллюляризации оценивалась по отсутствию генетического материала, определяемого методами окраски по Hoechst и гематоксилином с эозином. Проведен гистологический анализ биоматериала после консервации на различных сроках хранения, что подтвердило отсутствие биодеградации бесклеточных лентикул, которые оставались стерильными не менее 12 недель. Экспериментальное сравнительное исследование на кроликах продемонстрировало эффективность и безопасность предложенного метода.

This article addresses strategies for reducing corneal graft rejection and explores alternatives to full-thickness corneal transplantation. The objective of the study is to develop a technique for removing cellular material from human corneal lenticules obtained during refractive surgery for use as a biomaterial in keratoplasty. A decellularization procedure was developed in which lenticules were immersed in a 1% aqueous solution of sodium lauryl sulfate for 24 hours, followed by detergent removal using a buffered 0.9% NaCl solution for 5 days. Decellularization effectiveness was confirmed by the absence of genetic material using Hoechst staining and hematoxylin & eosin staining. Histological analysis of the biomaterial after preservation for various periods demonstrated no signs of biodegradation of the acellular lenticules, which remained sterile for at least 12 weeks. A comparative experimental study in rabbits demonstrated the efficacy and safety of the proposed technique.

кератопластикароговичная лентикулакроликэкспериментгистологияkeratoplastycorneal lenticulerabbitexperimenthistologyReferencesZhong W, Montana M, Santosa SM, Isjwara ID, Huang YH, Han KY et al. Angiogenesis and lymphangiogenesis in corneal transplantation – A review. Surv Ophthalmol. 2018; 63 (4): 453–479. doi: 10.1016/j.survophthal.2017.12.008.Zhong W, Montana M, Santosa SM, Isjwara ID, Huang YH, Han KY et al. Angiogenesis and lymphangiogenesis in corneal transplantation – A review. Surv Ophthalmol. 2018; 63 (4): 453–479. doi: 10.1016/j.survophthal.2017.12.008.Mandal S, Maharana PK, Kaweri L, Asif MI, Nagpal R, Sharma N. Management and prevention of corneal graft rejection. Indian J Ophthalmol. 2023; 71 (9): 3149– 3159. doi: 10.4103/IJO.IJO_228_23.Mandal S, Maharana PK, Kaweri L, Asif MI, Nagpal R, Sharma N. Management and prevention of corneal graft rejection. Indian J Ophthalmol. 2023; 71 (9): 3149– 3159. doi: 10.4103/IJO.IJO_228_23.Исаева ЕВ, Бекетов ЕЕ, Аргучинская НВ, Иванов СА, Шегай ПВ, Каприн АД. Децеллюляризованный внеклеточный матрикс для тканевой инженерии (обзор). Современные технологии в медицине. 2022; 14 (3): 57–69. Isaeva EV, Beketov EE, Arguchinskaya NV, Ivanov SA, Shegay PV, Kaprin AD. Decellularized Extracellular Matrix for Tissue Engineering (Review). Modern technologies in medicine. 2022; 14 (3): 57–69. doi: 10.17691/stm2022.14.3.07.Исаева ЕВ, Бекетов ЕЕ, Аргучинская НВ, Иванов СА, Шегай ПВ, Каприн АД. Децеллюляризованный внеклеточный матрикс для тканевой инженерии (обзор). Современные технологии в медицине. 2022; 14 (3): 57–69. Isaeva EV, Beketov EE, Arguchinskaya NV, Ivanov SA, Shegay PV, Kaprin AD. Decellularized Extracellular Matrix for Tissue Engineering (Review). Modern technologies in medicine. 2022; 14 (3): 57–69. doi: 10.17691/stm2022.14.3.07.Долбилкин АА, Юрьева ТН, Лозовская ЕА, Никифоров СБ. Тектоническая кератопластика с применением децеллюляризированных стромальных лентикул при тканевых дефектах роговицы: предварительные результаты. Офтальмохирургия. 2025; 1 (143): 6–17. Dolbilkin AA, Iureva TN, Lozovskaya EA, Nikiforov SB. Tectonic keratoplasty using decellularized stromal lenticules in corneal tissue defects: preliminary results. Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2025; 1 (143): 6–17. doi: 10.25276/0235-4160-2025-1-6-17.Долбилкин АА, Юрьева ТН, Лозовская ЕА, Никифоров СБ. Тектоническая кератопластика с применением децеллюляризированных стромальных лентикул при тканевых дефектах роговицы: предварительные результаты. Офтальмохирургия. 2025; 1 (143): 6–17. Dolbilkin AA, Iureva TN, Lozovskaya EA, Nikiforov SB. Tectonic keratoplasty using decellularized stromal lenticules in corneal tissue defects: preliminary results. Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2025; 1 (143): 6–17. doi: 10.25276/0235-4160-2025-1-6-17.Carreno-Galeano JT, Dohlman TH, Kim S, Yin J, Dana R. A Review of Ocular Graft-versus-Host Disease: Pathophysiology, Clinical Presentation and Management. Ocul Immunol Inflamm. 2021; 29 (6): 1190–1199. doi: 10.1080/09273948.2021.1939390.Carreno-Galeano JT, Dohlman TH, Kim S, Yin J, Dana R. A Review of Ocular Graft-versus-Host Disease: Pathophysiology, Clinical Presentation and Management. Ocul Immunol Inflamm. 2021; 29 (6): 1190–1199. doi: 10.1080/09273948.2021.1939390.Maharana PK, Mandal S, Kaweri L, Sahay P, Lata S, Asif MI et al. Immunopathogenesis of corneal graft rejection. Indian J Ophthalmol. 2023; 71 (5): 1733–1738. doi: 10.4103/IJO.IJO_2866_22.Maharana PK, Mandal S, Kaweri L, Sahay P, Lata S, Asif MI et al. Immunopathogenesis of corneal graft rejection. Indian J Ophthalmol. 2023; 71 (5): 1733–1738. doi: 10.4103/IJO.IJO_2866_22.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.